PCNA是2023年一款明星靶点。2023年8月1日，美国一家癌症治疗与研究机构希望之城(CH)在《细胞》子刊CCB发表的论文中，介绍了该机构团队开发了一款称之为AOH1996的PCNA靶向小分子抑制剂，在70多种癌细胞系中具有明显的生长抑制作用，而在多个非恶性细胞中并未发现显著性。由于该蛋白在以往被认为是“不可成药”，这一结果一经发布便迅速传遍行业内外，虽然其验数据仅限于细胞验阶段，但若能顺利通过临床试验上市，将为肿瘤治疗市场带来新的变革。
青云瑞晶已完成PCNA靶点1-261全长的蛋白表达和结构解析，针对该靶点及其抑制剂的共晶结构也累积了丰富的数据。同时储备了PCNA参与的DNA复制上下游相关靶点蛋白的表达、纯化和结晶经验。基于这些验条件和库存蛋白，青云瑞晶将项目的交付时间缩短至1-2个月，并确保项目的成功交付。
关于PCNA蛋白
PCNA全PCNA（U 12022）是增值细胞核抗原，在细胞核内合成并存在于细胞核内，为DNA聚合酶δ的辅助蛋白，确保聚合酶工作过程中不会从模板链脱离。它在真核生物DNA复制的控制中起重要作用。
PCNA研究历史
由M等于1978年在SLE（系统性红斑狼疮）患者的血清中首次发现抗增殖型细胞核抗原抗体并命，抗增殖型细胞核抗原抗体是系统性红斑狼疮的特异性抗体，可作为系统性红斑狼疮的标记性抗体，若检测阳性，则有可能患有系统性红斑狼疮。随后的研究发现PCNA与细胞DNA合成关系密切，在细胞增殖的启动上起重要作用，是反映细胞增殖状态的良好指标，因此近年来掀起了对PCNA研究的热潮，尤其在肿瘤方面。
PCNA作用机制
PCNA参与调节细胞DNA的合成，与细胞的增殖周期关系密切。其分子量为36KD，含9461个碱基对，编码261个氨基酸。PCNA在细胞周期所有阶段的细胞核中均可合成，在早期S期的表达升高，可通过复制因子C(C,RFC)环绕在DNA上，沿着DNA滑动。作为DNA复制的中心“枢纽”，它将DNA聚合酶、多种因子募集到DNA复制部位，并与这些蛋白的特定结构域“PIP”(PCNAIP，PCNA相互作用蛋白)结合后将其束缚在DNA双链上一起移动，使得DNA聚合酶在召集核苷酸、形成新的DNA链时不会脱离开DNA模板。研究发现，PCNA除了参与DNA的复制和损伤修复，还参与包括DNA基因重组、转录激活、染色质组装和细胞周期调控等过程。同时PCNA也是许多细胞功能的主要协同蛋白。
PCNA空间结构
功能性PCNA是由个单体组成的环状同源聚体，称为DNA夹，是DNA聚合酶(，)δ和ε的辅助因子。同源聚体环的内表面是由α-螺旋构成，带有正电荷，恰好与DNA链磷酸基团末端的负电荷相互吸引，DNA双链可以穿过同源聚体环内表面，PCNA可以在DNA链上双向自由滑动；外表面是由β-折叠构成。每个PCNA单体包含两个结构类似的球形结构域，连接着两个结构域的是一段长的卷曲的环状结构(IDCL)。PCNA分子环状结构内部直径为35?,而DNA链的直径为20?,恰好可以容纳其中。当PCNA与DNA结合时,就像夹环一样将DNA链套在其中。
PCNA蛋白验结果展示
解析PCNA与药物的复合物结构对于开发相关靶点药物具有重要意义。青云瑞晶针对PCNA完成了1-261全长蛋白的表达、纯化和结晶，针对该靶点及其抑制剂的共晶结构也累积了丰富的数据。同时储备了PCNA参与的DNA复制上下游相关靶点蛋白的表达、纯化和结晶经验，满足企业药物研发需求。
表达纯化结果（周期：现货或者3周）
结晶和结构解析（周期：1-2周）
PCNA蛋白行业研发状况
除了国内，晶型稳定性研究在国际领域也崭露头角逐渐的受到更多外国友人的青睐。青云瑞晶是一家专业的CRO公司,提供结构生物学、药物固态研究及新材料结构解析等服务,拥有国内首个MicroED结构解析技术平台,结合X射线衍射及冷冻电镜技术,为客户在结构解析领域解决难点问题!https://www.readcrystal.com/[imghttps://www.readcrystal.com/uploads/20240906/32ac60481842648bbb740ca106e2abac.png[/img]
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发表于 2024-10-14 09:12:44